Szybki, jednostopniowy test immunochromatograficzny do wykrywania antygenu Helicobacter pylori w ludzkim kale.
WSTĘP
Helicobacter pylori (znana również jako Campylobacter pylori) jest Gram-ujemną bakterią o spiralnym kształcie i wielkości od 0,5 do 5 µm, gnieżdżącą się w błonie śluzowej żołądka. Zakażenie H. pylori jest prawdopodobnie najczęstszą infekcją bakteryjną na świecie. Ocenia się, że w Polsce dotyczy to około 70-80% ludności. Zakażenie wywołane H. pylori może powodować stany zapalne błony śluzowej, doprowadzając do choroby wrzodowej żołądka i dwunastnicy, a także zwiększa ryzyko powstania raka żołądka. Dlatego WHO w 1994 r. zaliczyła H. pylori do I klasy czynników rakotwórczych. Najbardziej zjadliwymi szczepami H. pylori zwiększającymi ryzyko powstawania chorób są mikroorganizmy posiadające gen cagA, który koduje cytotoksynę CagA i gen vacA, kodujący cytotoksynę VacA. Obie te cytotoksyny mają właściwości bezpośredniego uszkadzania komórek nabłonka, hamują syntezę DNA i poliferację tych komórek. Do klinicznego rozpoznania zakażenia H. pylori służą metody inwazyjne (wymagające pobrania wycinka błony śluzowej za pomocą endoskopu) i nieinwazyjne (badanym materiałem jest krew, ślina, kał lub wydychane powietrze). Do testów inwazyjnych należą: test ureazowy, badanie mikrobiologiczne (posiew), badanie histologiczne wycinków lub badanie histologiczne łącznie z testem ureazowym (tzw. „złoty standard”) oraz PCR. Testy nieinwazyjne to testy oddechowe ze znakowanym węglem C14 lub C13, badania serologiczne – oznaczanie w surowicy przeciwciał w klasie IgA, IgG i IgM oraz oznaczanie antygenów H. pylori w kale. Podczas przebiegu zakażenia wywołanego przez zlokalizowane w nabłonku żołądka pałeczki H. pylori może dochodzić do znacznej koncentracji antygenów tej bakterii w kale. Obecność antygenów H. pylori w kale jest wskaźnikiem aktualnego zakażenia tymi bakteriami, natomiast ich zanik świadczy o skutecznej eradykacji drobnoustrojów.
ZASADA DZIAŁANIA TESTU
Helicobacter Antygen Test jest szybkim, jakościowym, jednostopniowym testem do wykrywania antygenu Helicobacter pylori w próbkach kału. Zasada działania testu oparta jest na metodzie immunochromatograficznej. Na pasek membrany umieszczony w plastikowej obudowie/płytce naniesiono specyficzne przeciwciała monoklonalne skierowane przeciwko bakterii H. pylori. W początkowym odcinku tego paska naniesiono koniugat złota koloidalnego z monoklonalnymi przeciwciałami anty-H. pylori. Wykonanie oznaczenia polega na wyekstrahowaniu antygenu H. pylori z próbki badanego kału i nakropleniu ekstraktu na płytkę testową. Jeżeli w badanej próbce obecny jest antygen H. pylori, to powstaje barwny kompleks: antygen H. pylori - przeciwciało - koniugat przeciwciała ze złotem koloidalnym i tworzy się barwny prążek testowy T. Brak barwnego prążka w strefie testowej świadczy o nieobecności bakterii H. pylori w badanej próbce. Ekstrakt przemieszcza się dalej wzdłuż płytki do strefy kontrolnej i tworzy się barwny prążek kontrolny C. Obecność tego prążka świadczy o prawidłowym wykonaniu i działaniu testu oraz o dobrej jakości odczynników.
