TRIO Toxin A/B/ GDH Check-1

Szybki test immunochromatograficzny do wykrywania toksyny A, toksyny B i GDH bakterii Clostridium difficile w kale.

WSTĘP

Clostridium difficile stanowi główną przyczynę biegunek po terapii antybiotykowej i może prowadzić do rzekomobłoniastego zapalenia jelita grubego (1). Jest to obecnie jeden z najczęściej wykrywanych patogenów i ważna przyczyna zakażeń szpitalnych i w domach opieki (2, 3). Organizm ten został wyizolowany z różnych siedlisk przyrodniczych: gleby, siana, piasku, gnoju, od dużych ssaków (krowy, osła i konia), a także od psa, kota, gryzoni i z ludzkich odchodów (4). C.difficile wytwarza co najmniej trzy potencjalne czynniki wirulencji, z których toksyny A i toksyny B są uważane za najważniejsze w patogenezie chorób związanych z C.difficile (5). Toksyna A jest enterotoksyną, która wydaje się wpływać na cytoszkielet komórek nabłonka jelit, niszcząc tkankę. Natomiast toksyna B to cytotoksyna, która powoduje silne zmiany cytopatyczne w linii komórkowej hodowli tkankowej (6). GDH, znana jako antygen C. difficile, jest metabolicznym enzymem produkowanym w dużych ilościach przez wszystkie toksyczne i nietoksyczne szczepy, co czyni go doskonałym markerem dla organizmu (6, 7) Ponieważ nie wszystkie szczepy Clostridium difficile wytwarzają toksyny i ok. 2% zdrowych osób dorosłych oraz do 50% dzieci poniżej 2 lat może być nosicielami, wykrywanie toksyn (toksyny A i toksyny B) i GDH w próbkach kału pacjentów z biegunką jest ważniejsze niż hodowla bakterii. TRIO TOXIN A/B/GDH-CHECK-1 jest szybkim testem immunochromatograficznym do jakościowego wykrywania toksyny A, toksyny B i GDH Clostridium difficile w próbkach ludzkiego kału. Płytka testowa składa z plastikowej obudowy zawierającej 3 paski przeznaczone do wykrywania toksyny A, toksyny B lub GDH C.difficile. Po lewej stronie membrany naniesiony jest barwny koniugat monoklonalnych przeciwciał skierowanych przeciwko toksynie A, toksynie B, GDH bakterii Clostridium difficile i złota koloidalnego.
Badaną próbkę kału umieszcza się w pojemniku zawierającym roztwór ekstrakcyjny, a następnie kilka kropli ekstraktu nanosi się do każdego okienka () na płytce testowej.
Podczas przepływu próbki przez warstwę absorbentu, przeciwciała znakowane barwnikiem (koniugat) łączą się z toksyną A, toksyną B lub GDH (jeśli są obecne w próbce) tworząc kompleks antygen-przeciwciało. W strefie testowej kompleks ten łączy się z przeciwciałami skierowanymi przeciwko toksynie A, toksynie B lub GDH i powstaje różowy prążek. W przypadku braku toksyny A, toksyny B lub GDH w badanej próbce, prążek ten nie powstaje. Podczas dalszego przepływu mieszaniny reakcyjnej przez warstwę absorbentu dociera ona do strefy kontrolnej. Niezwiązany koniugat wiąże się z reagentami w strefie kontrolnej i powstaje różowy prążek wskazujący na poprawne wykonanie i działanie testu.